Hilde de Rooster a obtenu son diplôme de vétérinaire à l'université de Gand en 1993. Elle a ensuite obtenu un master supplémentaire en orthopédie en Écosse. Elle a ensuite travaillé pendant 8 ans dans une clinique vétérinaire pour petits animaux. Parallèlement, elle a travaillé sur une thèse de doctorat consacrée à la rupture du ligament croisé. Depuis 2003, elle travaille comme chirurgienne des tissus mous à l'université de Gand et a obtenu son diplôme en 2008. Outre l'enseignement théorique et pratique, elle supervise diverses recherches et projets de doctorat, axés sur la cicatrisation des plaies et l'utilisation des antibiotiques, les shunts portosystémiques extra-hépatiques et l'oncologie.